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流式细胞仪怎么工作?
来源:时间:2021-10-29
流式细胞仪怎么工作?流式细胞技能是一种用于剖析细胞的具有多种应用的技能,包括细胞计数、表型剖析、细胞周期评估和生存力检测等不同应用。流式细胞仪中激光发生的光被样品中的细胞散射,由检测器丈量,然后转换为能够剖析和丈量的信号。流式细胞仪有三个首要组成部分:液流体系,光学体系和电子体系。
开始使用流式细胞仪,第壹步是准备要剖析的样品。从细胞培养物,血液或分化的安排中取得的细胞应制成悬浮液。将该细胞悬浮液分红数个试管进行染色,保存未染色细胞作为对照。通过增加符号有荧光探针的抗体或染色细胞成分的染料对其他细胞样品染色。剖析细胞内蛋白质时,首要必须将细胞固定(使用福尔马林缓冲液)并进行透化(使用透化剂),以使抗体和染料进入细胞。细胞与抗体或染料孵育后,将细胞在缓冲液中洗涤,然后重悬在基于盐的缓冲液中进行剖析。然后将准备好的样品引入流式细胞仪。
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