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实时荧光PCR仪是什么
来源:时间:2019-07-01
实时荧光PCR仪是什么
技术发明史
● 1992年由日本科学家Higuchi在报告中提出
● 1996年由美国Applied Biosystems公司推出
技术发展趋势
● 从单一的染料染色法发展到特异性更高的探针法
● 从开始的只能检测单一波长光源发展到可以检测多种波长光源
技术原理
首先在PCR扩增反应的开始数个循环里,荧光信号变化不大,接近一条直线,这样的直线即是基线,这条线是可以自动生成也可以手动设置的。之后反应会进入指数增长期,这个期间扩增曲线具有高度重复性,在该期间,可设定一条荧光阈值线,它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上,但一般会将荧光阈值的缺省设置是
3-15 个循环的荧光信号的标准偏差的10
倍。每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数被称为CT值,这个值与起始浓度的对数成线性关系,且该值具有重现性。
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