实时荧光定量PCR是什么

实时荧光定量PCR是什么？
这是一种可以实时监控核酸扩增的技术，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化对PCR过程进行实时监控，以此实现对初始模板的定量分析，可简称为qPCR或real-time PCR，但绝非RT-PCR，这是逆转录PCR的意思。
相较于常规PCR，借助电泳对扩增反应的终产物进行半定量及定性分析，qPCR利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，精确的对起始模板定量分析。

技术发明史
1992年由日本科学家Higuchi在报告中提出
1996年由美国Applied Biosystems公司推出
技术发展趋势
从单一的染料染色法发展到特异性更高的探针法
从开始的只能检测单一波长光源发展到可以检测多种波长光源
技术原理
首先在PCR扩增反应的数个循环里，荧光信号变化不大，接近一条直线，这样的直线即是基线，这条线是可以自动生成也可以手动设置的。之后反应会进入指数增长期，这个期间扩增曲线具有高度重复性，在该期间，可设定一条荧光阈值线，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上，但一般会将荧光阈值的缺省设置是 3-15 个循环的荧光信号的标准偏差的10 倍。每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数被称为CT值，这个值与起始浓度的对数成线性关系，且该值具有重现性。